標本處理(li)不當將可(ke)能引(yin)起比分(fen)析更(geng)大的(de)(de)(de)誤(wu)差(cha)。因此,應根(gen)據(ju)分(fen)析目的(de)(de)(de)選擇合適的(de)(de)(de)抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)和處理(li)方法(fa)。應用(yong)(yong)物理(li)或(huo)(huo)化(hua)學方法(fa)除去(qu)或(huo)(huo)抑制(zhi)血液(ye)(ye)中的(de)(de)(de)某些凝(ning)(ning)血因子,阻止血液(ye)(ye)凝(ning)(ning)固,稱(cheng)為抗(kang)凝(ning)(ning)。阻止血液(ye)(ye)凝(ning)(ning)固的(de)(de)(de)化(hua)學試(shi)劑(ji)稱(cheng)為抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)(anticoagulant)。對(dui)抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)的(de)(de)(de)一(yi)般要求是用(yong)(yong)量少(shao)、溶解度(du)大、不影響測定(ding)。采血管(guan)(guan)(guan)分(fen)普通管(guan)(guan)(guan)、抗(kang)凝(ning)(ning)管(guan)(guan)(guan)和促凝(ning)(ning)管(guan)(guan)(guan)三類。常(chang)用(yong)(yong)抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)有草(cao)酸(suan)(suan)鉀、草(cao)酸(suan)(suan)鈉、枸櫞酸(suan)(suan)鈉、EDTA-K2或(huo)(huo)EDTA-Na2、肝素、氟化(hua)物等。根(gen)據(ju)不同的(de)(de)(de)檢驗項目,選用(yong)(yong)合適的(de)(de)(de)抗(kang)凝(ning)(ning)劑(ji)十分(fen)重(zhong)要。試(shi)管(guan)(guan)(guan)顏色參見《抽血順序和試(shi)管(guan)(guan)(guan)標志(zhi)》。
普通(tong)血清管(guan):紅色頭蓋(gai),采血管內不(bu)含添加劑(ji),用于(yu)常規血清(qing)生化和血清(qing)學(xue)相(xiang)關(guan)檢驗。
促凝管:
1、快(kuai)速血清管:橘紅色頭蓋(gai),采血管內有促凝(ning)劑,可激活纖(xian)維(wei)(wei)(wei)蛋(dan)(dan)白酶,使(shi)(shi)可溶(rong)性(xing)纖(xian)維(wei)(wei)(wei)蛋(dan)(dan)白變(bian)為不可溶(rong)的纖(xian)維(wei)(wei)(wei)蛋(dan)(dan)白多(duo)聚體,進(jin)而形成(cheng)穩(wen)定的纖(xian)維(wei)(wei)(wei)蛋(dan)(dan)白凝(ning)塊。快速血清(qing)(qing)管可在5分鐘內使(shi)(shi)采集的血液凝(ning)固,適(shi)用于急診血清(qing)(qing)生化試驗(yan)。
2、惰性分離膠促凝管:金黃(huang)頭蓋,采血管(guan)內(nei)添加有惰性分(fen)(fen)(fen)離膠和(he)促凝(ning)劑。標本離心后,惰性分(fen)(fen)(fen)離膠能夠將血液(ye)中的液(ye)體成分(fen)(fen)(fen)(血清或血漿)和(he)固體成分(fen)(fen)(fen)(紅細胞、白細胞、血小板(ban)、纖(xian)維蛋白等)徹底分(fen)(fen)(fen)開并完全積(ji)聚(ju)在試(shi)管(guan)中央而形(xing)成屏障(zhang),標本在48h內(nei)保持穩定。促凝(ning)劑可快(kuai)速(su)激活凝(ning)血機制,加速(su)凝(ning)血過程,適用于急診血清生(sheng)化(hua)試(shi)驗。
抗凝管:
1、肝素抗凝管:綠(lv)色(se)頭蓋,采血(xue)(xue)(xue)管內添加(jia)有(you)肝素(su)。肝素(su)是(shi)一(yi)種含有(you)硫酸基(ji)團的(de)粘多糖,具(ju)有(you)對(dui)抗(kang)(kang)凝(ning)血(xue)(xue)(xue)活酶(mei)(mei)和(he)凝(ning)血(xue)(xue)(xue)酶(mei)(mei)的(de)形(xing)成和(he)活性,阻(zu)止血(xue)(xue)(xue)小板(ban)聚集作(zuo)用(yong),可(ke)抑制凝(ning)血(xue)(xue)(xue)酶(mei)(mei)原(yuan)轉(zhuan)化為凝(ning)血(xue)(xue)(xue)酶(mei)(mei),使(shi)(shi)纖(xian)維蛋(dan)白(bai)(bai)原(yuan)不(bu)能(neng)轉(zhuan)化為纖(xian)維蛋(dan)白(bai)(bai),從(cong)而延長標本凝(ning)血(xue)(xue)(xue)時間。肝素(su)抗(kang)(kang)凝(ning)血(xue)(xue)(xue)不(bu)影響紅細(xi)胞體積,適用(yong)于紅細(xi)胞脆性試驗、血(xue)(xue)(xue)氣分析、紅細(xi)胞壓積試驗、血(xue)(xue)(xue)沉及(ji)普(pu)通生化測定,但(dan)不(bu)可(ke)用(yong)于篩選DIC的(de)3P和(he)TT試驗,因肝素(su)與魚(yu)精蛋(dan)白(bai)(bai)作(zuo)用(yong)發(fa)生沉淀,使(shi)(shi)3P出(chu)現(xian)假陽性以及(ji)肝素(su)的(de)抗(kang)(kang)凝(ning)血(xue)(xue)(xue)酶(mei)(mei)作(zuo)用(yong)出(chu)現(xian)產生干(gan)擾。過量的(de)肝素(su)會(hui)引起白(bai)(bai)細(xi)胞的(de)聚集,不(bu)能(neng)用(yong)于白(bai)(bai)細(xi)胞計數(shu)。因其可(ke)使(shi)(shi)血(xue)(xue)(xue)片染色(se)后背景(jing)呈淡藍色(se),故也不(bu)適于白(bai)(bai)細(xi)胞分類。15±2.5IU肝素(su)抗(kang)(kang)凝(ning)血(xue)(xue)(xue)液1ml。
2、血漿分離管:淺(qian)綠色頭蓋,在惰性分離膠管(guan)內(nei)加入肝素(su)鋰抗凝劑,可(ke)達到快速(su)分離血(xue)(xue)漿的目(mu)的,是電解質檢(jian)測(ce)的[敏感詞]選擇,也可(ke)用于(yu)常規血(xue)(xue)漿生化(hua)測(ce)定和(he)ICU等急診(zhen)血(xue)(xue)漿生化(hua)檢(jian)測(ce)。血(xue)(xue)漿標本可(ke)直接上(shang)機并在冷藏狀態下保持48h穩定。
3、EDTA抗凝管:紫色頭蓋,乙(yi)二(er)胺(an)四乙(yi)酸(suan)(suan)(EDTA,分子(zi)(zi)(zi)量292)及(ji)其(qi)鹽是一種氨(an)基多(duo)羧基酸(suan)(suan),可(ke)以有(you)效地螯合血(xue)液標(biao)本(ben)中(zhong)的鈣(gai)(gai)離子(zi)(zi)(zi)。螯合鈣(gai)(gai)或將鈣(gai)(gai)從反應(ying)位點移去(qu)將阻滯和(he)終止內(nei)源性或外源性凝(ning)(ning)血(xue)過程,從而(er)防止血(xue)液標(biao)本(ben)凝(ning)(ning)固。適(shi)用(yong)(yong)于一般血(xue)液學(xue)檢(jian)驗(通常血(xue)液學(xue)常規檢(jian)驗應(ying)用(yong)(yong)其(qi)鉀(jia)鹽EDTA-K2或EDTA-K3),不適(shi)用(yong)(yong)于凝(ning)(ning)血(xue)試驗及(ji)血(xue)小板功能檢(jian)查,亦不適(shi)用(yong)(yong)于鈣(gai)(gai)離子(zi)(zi)(zi)、鉀(jia)離子(zi)(zi)(zi)、鈉離子(zi)(zi)(zi)、鐵離子(zi)(zi)(zi)、堿(jian)性磷酸(suan)(suan)酶、肌酸(suan)(suan)激(ji)酶和(he)亮氨(an)酸(suan)(suan)氨(an)基肽酶的測定及(ji)PCR試驗。EDTA-Li2亦可(ke)作為抗凝(ning)(ning)劑(ji),且可(ke)用(yong)(yong)于大多(duo)數生(sheng)化檢(jian)驗。
4、枸櫞酸鈉凝血試驗管:淺(qian)藍(lan)頭蓋,枸櫞酸鈉主要通(tong)過與(yu)(yu)血(xue)樣中鈣離子螯合而起抗凝作用(yong)(yong)。適(shi)用(yong)(yong)于凝血(xue)實驗,抗凝劑與(yu)(yu)血(xue)液的比例是(shi)1∶9。
5、枸櫞酸鈉血沉試驗管:黑色(se)頭蓋(gai),血(xue)沉(chen)試驗(yan)要求的構櫞酸鈉(na)濃度是3.2%(相當于0.109mol/L),抗凝劑與血(xue)液的比例為(wei)1∶4。
其他抗凝劑注意事項
1、草酸鉀(jia)(jia):草酸鉀(jia)(jia)可(ke)與(yu)血中鈣(gai)離子生成草酸鈣(gai)沉淀(dian),從而阻止血液凝(ning)(ning)固(gu)。草酸鉀(jia)(jia)溶解度大(da),抗凝(ning)(ning)作用(yong)(yong)強。常用(yong)(yong)量為1~2mg/ml血液。草酸鉀(jia)(jia)雖仍(reng)可(ke)應用(yong)(yong),但使紅細胞縮小,水分從紅細胞滲入(ru)血漿,使血漿成分濃度相應偏低(di)。
2、草酸鹽(yan)、氟(fu)化物(wu)不能用(yong)于(yu)測(ce)定(ding)酶和用(yong)酶法測(ce)定(ding)的標本,因為它(ta)們(men)有激活或抑(yi)制(zhi)某(mou)些酶活性的作用(yong),如草酸鹽(yan)可抑(yi)制(zhi)AMY、ACP、LDH的活性,氟(fu)化物(wu)則(ze)有激活尿素酶、AMY的作用(yong)。
3、草酸鉀(jia)氟(fu)化鈉混(hun)合(he)抗(kang)(kang)凝(ning)劑(ji):專供葡萄糖(tang)(tang)(tang)測(ce)定用(yong),氟(fu)化鈉1g,草酸鉀(jia)3g混(hun)合(he),混(hun)合(he)劑(ji)4mg抗(kang)(kang)凝(ning)1ml血。氟(fu)離子能結合(he)鈣而抗(kang)(kang)凝(ning),但抗(kang)(kang)凝(ning)效果較弱(ruo)。氟(fu)離子可(ke)(ke)抑制糖(tang)(tang)(tang)酵(jiao)(jiao)解中(zhong)的(de)(de)烯醇化酶(mei),防止糖(tang)(tang)(tang)酵(jiao)(jiao)解,若未加氟(fu)化鈉,血標本中(zhong)葡萄糖(tang)(tang)(tang)含量將以每小時6%的(de)(de)速度下(xia)降(jiang)。而在(zai)氟(fu)化鈉的(de)(de)存在(zai)下(xia),血糖(tang)(tang)(tang)濃度在(zai)25℃可(ke)(ke)穩(wen)定24h,4℃可(ke)(ke)穩(wen)定48h。因此,草酸鉀(jia)-氟(fu)化鈉是血糖(tang)(tang)(tang)測(ce)定標本常使用(yong)的(de)(de)抗(kang)(kang)凝(ning)劑(ji)。
4、EDTA、氟(fu)化物、草酸鹽等不(bu)(bu)能(neng)用(yong)于(yu)測(ce)定(ding)Ca2+的標本,因為(wei)Ca2+可(ke)與它們形(xing)成不(bu)(bu)溶性物質。含有K+、Na+的抗凝劑不(bu)(bu)能(neng)用(yong)于(yu)測(ce)定(ding)K+、Na+的標本。
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